英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細(xì)胞分離試劑盒（SN3104）：20分鐘解鎖96.8%高純度細(xì)胞分選

　　在免疫學(xué)研究和細(xì)胞治療領(lǐng)域，精準(zhǔn)獲取高純度naïve CD4 T細(xì)胞是攻克自身免疫疾病、優(yōu)化CAR-T療法的關(guān)鍵。英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細(xì)胞分離試劑盒（貨號(hào)SN3104）憑借無柱磁極分選技術(shù)和陰性篩選策略，實(shí)現(xiàn)從PBMC中快速分離目標(biāo)細(xì)胞，為科研與臨床提供高效解決方案。

　　一、技術(shù)原理：陰性分選保障細(xì)胞活性

　　本試劑盒采用生物素-鏈霉親和素磁珠偶聯(lián)系統(tǒng)，通過三步精準(zhǔn)標(biāo)記實(shí)現(xiàn)高效分離：

　　1.靶向標(biāo)記非目標(biāo)細(xì)胞：生物素偶聯(lián)抗體特異性結(jié)合CD8?T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核細(xì)胞等非naïve CD4 T細(xì)胞表面標(biāo)志物

　　2.磁珠高效捕獲：鏈霉親和素納米磁珠（40 nm粒徑）與標(biāo)記細(xì)胞結(jié)合，形成磁性復(fù)合物

　　3.無柱磁極快速分離：通過磁力架吸附非目標(biāo)細(xì)胞，未標(biāo)記的CD45RA?CD45RO?naïve CD4 T細(xì)胞直接富集于上清液

　　技術(shù)優(yōu)勢(shì)：

　　?避免抗體與目標(biāo)細(xì)胞接觸，維持天然細(xì)胞狀態(tài)

　　?納米磁珠減少機(jī)械損傷，細(xì)胞活性**>95%**

　　?全程無需分選柱，降低樣本損失風(fēng)險(xiǎn)

　　二、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程（18-20分鐘完成）

　　1.PBMC預(yù)處理

　　采用密度梯度離心法獲取PBMC，調(diào)整濃度至1×10?cells/mL，70μm濾網(wǎng)過濾去除團(tuán)塊

　　2.抗體孵育（10分鐘）

　　按100μL/mL比例加入分離雞尾酒，常溫孵育10分鐘，標(biāo)記非目標(biāo)細(xì)胞

　　3.磁珠偶聯(lián)（5分鐘）

　　震蕩激活鏈霉親和素納米磁珠30秒，以100μL/mL加入樣本，輕柔混勻后靜置

　　4.體積擴(kuò)展與磁分選

　　1.流式管體系：補(bǔ)加FACS Buffer至2.5 mL

　　2.離心管體系：補(bǔ)加至7.5 mL

　　垂直置于磁力架吸附（單孔3分鐘/聯(lián)排5分鐘），傾倒上清即獲目標(biāo)細(xì)胞

　　三、性能驗(yàn)證與核心數(shù)據(jù)

　　經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證（圖B）：

　　?分選前：PBMC中CD4?T細(xì)胞占比31%，其中naïve亞群僅43%

　　?分選后：

　　?CD4?T細(xì)胞純度97.1%

　　?CD45RA?CD45RO?naïve亞群純度96.8%

　　?細(xì)胞得率≥85%（與樣本質(zhì)量相關(guān)）

　　關(guān)鍵質(zhì)控提示：

　　•使用含2%FBS的專用FACS Buffer，避免滲透壓波動(dòng)

　　•嚴(yán)格無菌操作，確保細(xì)胞培養(yǎng)兼容性

　　•建議搭配聯(lián)排磁力架處理多樣本

　　四、三大應(yīng)用場(chǎng)景推薦

　　1.免疫機(jī)制研究：分離后的naïve CD4 T細(xì)胞可直接用于：

　?。?）TCR信號(hào)通路分析

　?。?）Th細(xì)胞分化動(dòng)態(tài)追蹤

　?。?）單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序建庫

　　2.細(xì)胞治療開發(fā)：

　　（1）CAR-T療法中naïve T細(xì)胞的優(yōu)先選用

　?。?）腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（TIL）擴(kuò)增前分選

　　3.疾病模型構(gòu)建：

　?。?）自身免疫疾病過繼轉(zhuǎn)移模型

　?。?）HIV潛伏感染機(jī)制研究

　　為何選擇SN3104？

　　•時(shí)間成本銳減：比流式分選快6倍，較傳統(tǒng)磁珠分選省30%操作步驟

　　•成本效益突出：單次處理量達(dá)1×10?細(xì)胞（SN3104L規(guī)格），適合大規(guī)模實(shí)驗(yàn)

　　•數(shù)據(jù)可重復(fù)性高：經(jīng)多中心驗(yàn)證，批間差<5%

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